Embalagem 500gr  AGC-8014 –
Embalagem 25gr  AGC-8014-25

HiCromeTM Ágar Base cromogênico VRE é um meio seletivo usado para o isolamento de Enterococcus Resistentes à Vancomicina (VRE) de amostras clínicas.

COMPOSIÇÃO **
Ingredientes (g/L)
Peptona especial: 25.000
Mistura cromogênica: 0.450
Cloreto de sódio: 5.000
Agente buffer: 1.250
Mistura de sal: 4.250
Ágar: 15.000
pH final (a 25°C): 6.5 ±0.2

**Fórmula ajustada, padronizada para se adequar aos parâmetros de desempenho

INSTRUÇÕES
Suspenda 50,95g em 1000mL de água purificada/destilada. Aqueça até a fervura para dissolver o meio completamente. Esterilize em autoclave a 15 libras de pressão (121°C) por 15 minutos. Esfriar de 45°C a 50°C e assepticamente adicione o conteúdo reidratado de dois frascos de suplemento de HiCrome? ágar VRE (FD277). Misture bem e despeje em placas de Petri estéreis.

PRINCÍPIO E INTERPRETAÇÃO
Enterococcus são os habitantes comuns da flora normal que reside nos intestinos dos mamíferos (3). Enterococcus Resistentes à Vancomicina são o grupo de Enterococcus que desenvolveram resistência a muitos antibióticos, particularmente a vancomicina. Infecções enterocócicas que resultam em doenças humanas podem ser fatais, particularmente aquelas causadas por cepas de Enterococcus Resistentes à Vancomicina (VRE) (4). A detecção precoce de VRE é importante para prevenir o surgimento de Enterococcus faecalis resistentes à vancomicina.
O VRE pode ser transmitido de pessoa para pessoa, especialmente em um hospital ou instalação de cuidados crônicos. Quantidades microscópicas de material fecal de um paciente infectado ou colonizado podem contaminar o ambiente hospitalar e ser uma razão para a disseminação da infecção. Existem muitos meios tradicionais para a detecção de VRE, que incluem Caldo Base/Ágar de Enterococcus Resistente à Vancomicina ou Ágar Bile Esculina suplementado com vancomicina.
A peptona especial no meio fornece compostos nitrogenados e carbonáceos, aminoácidos de cadeia longa, vitaminas e outros nutrientes necessários para o crescimento de microorganismos. O cloreto de sódio mantém o equilíbrio osmótico. Os agentes de buffer fornecem tamponamento para o meio. Enterococcus faecalis cliva o substrato cromogênico no meio para produzir colônias de cor azul, que são claramente visíveis contra o fundo opaco. O suplemento adicionado ao meio permite o isolamento seletivo de Enterococcus Resistentes à Vancomicina. Este meio pode ser inoculado diretamente do swab de triagem, colônia isolada preparada como uma suspensão líquida aproximadamente equivalente a 0,5 de turbidez de McFarland.

TIPO DE AMOSTRA
Amostras clínicas – amostra fecal

COLETA E MANUSEIO DE AMOSTRAS
Para amostras clínicas, siga as técnicas apropriadas para o manuseio de amostras de acordo com as diretrizes estabelecidas (1,2). Após o uso, os materiais contaminados devem ser esterilizados em autoclave antes de serem descartados.

AVISO E PRECAUÇÕES
Uso para diagnóstico In Vitro. Leia o rótulo antes de abrir o recipiente. Use luvas de proteção / roupas de proteção / proteção de olhos / proteção facial. Siga as boas práticas de laboratório microbiológico ao manusear amostras e cultura. As precauções padrão de acordo com as diretrizes estabelecidas devem ser seguidas durante o manuseio de amostras clínicas. As diretrizes de segurança podem ser referidas em fichas de dados de segurança individuais.

LIMITAÇÕES
1. Algumas espécies intermediárias podem apresentar baixo crescimento devido a variações nutricionais e tolerância à vancomicina.
2. Ligeira variação de cor pode ser observada dependendo da utilização do substrato pelo organismo.
3. A diferenciação entre espécies entre Enterococcus faecalis e Enterococcus faecium não pode ser confirmada.
4. Uma confirmação adicional deve ser realizada por meio de testes de sensibilidade.

DESEMPENHO E AVALIAÇÃO
O desempenho do meio é esperado quando usado de acordo com as instruções no rótulo dentro do período de validade e quando armazenado na temperatura recomendada.

CONTROLE DE QUALIDADE
Aparência: Pó homogêneo de fluxo livre, de creme a Amarelo
Gelificação: Firme, comparável com o gel de ágar a 1,5%
Cor e clareza do meio preparado: Formas de gel opaco esbranquisado em placas de Petri
Reação: Reação de 5.1% p/v em solução aquosa a 25°C. pH: 6.5 ±0.2
pH: 6.30 – 6.70

RESPOSTA CULTURAL
Características culturais observadas com a adição do suplemento de HiCrome ? Ágar VRE (FD277), após incubação de 35°C a 37°C por 24-48 horas.

Organismo: Enterococcus faecalis (VRE) ATCC 51299 (00085*)
Inóculo(UFC): 50-100
Crescimento: Exuberante
Recuperação: >=50%
Cor da colônia: Verde azulado

Organismo: Enterococcus faecalis ATCC 29212 (00087*)
Inóculo(UFC): >=10^4
Crescimento: Inibido
Recuperação: 0
Cor da colônia: –

Organismo: Staphylococcus aureus subsp. aureus ATCC 25923 (00034*)
Inóculo(UFC): >=10^4
Crescimento: Inibido
Recuperação: 0
Cor da colônia: –

Chave: * Números WDCM Correspondentes

ARMAZENAMENTO E VIDA ÚTIL
Armazenar entre 15°C e 25°C em um recipiente bem fechado e o meio preparado entre 2°C e 8°C. Use antes da data de validade no rótulo. Na abertura, o produto deve ser devidamente armazenado seco, após tampar bem o frasco para evitar formação de grumos devido à natureza higroscópica do produto. O armazenamento inadequado do produto pode levar à formação de caroços. Armazenar em área ventilada e seca protegida de extremos de temperatura e fontes de ignição. Selar o recipiente hermeticamente depois de usar. O desempenho do produto é melhor se usado dentro do período de validade declarado.

DISPOSIÇÃO
O usuário deve garantir o descarte seguro por autoclavagem e/ou incineração das preparações usadas ou inutilizáveis deste produto. Seguir procedimentos laboratoriais estabelecidos para o descarte de materiais infecciosos e materiais que entram em contato com a amostra devem ser descontaminados e descartados de acordo com as técnicas laboratoriais vigentes (1,2).

REFERÊNCIAS
1. Isenberg, H.D. Clinical Microbiology Procedures Handbook 2nd Edition.
2. Jorgensen, J.H., Pfaller, M.A., Carroll, K.C., Funke, G., Landry, M.L., Richter, S.S and Warnock., D.W. (2015) Manual of Clinical Microbiology, 11th Edition. Vol. 1.
3. Mara D., Horan NJ: The Handbook of water, wastewater and microbiology, Amsterdam, The Netherlands, Academic Press; 2003.
4. Mascini EM, Bonten MJ: Vancomycin- resistant enterococci: consequences for therapy and infection control. Clin Microbiol Infect.2005,11 (Suppl.4) :43-56.